為使儀器保持*工作狀態(tài)應(yīng)建立維護(hù)和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），所要控制的儀器包括移液器（加樣槍），水浴箱（溫箱），洗板機(jī)和酶標(biāo)儀。
◎移液器：ELISA加樣量小（5-100ｕl），其準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，利用稱重法檢查：吸取刻度指示量的水，萬(wàn)分之一天平稱重后計(jì)算吸量是否準(zhǔn)確，一般應(yīng)在±10%以內(nèi)；
◎水浴箱 經(jīng)常檢查水浴箱溫度計(jì)所示的溫度和水中（或溫箱內(nèi)）實(shí)測(cè)溫度是否一致，ELISA試劑盒允許有±1℃的誤差；
◎洗板機(jī) 每個(gè)廠家設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定一般不超過(guò)2ul ，人工扣板時(shí)，墊紙不濕，定期檢查管孔是否堵塞；
◎酶標(biāo)儀 經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分，防止濾光片霉變，ELISA試劑盒定期檢測(cè)校正，使其保持良好的工作性能。
附1：酶標(biāo)儀校正程序
◎?yàn)V光片波長(zhǎng)精度檢查：將不同波長(zhǎng)的濾光片從酶標(biāo)儀上卸下，用UV-2201型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（波長(zhǎng)精度±0.3nm）于可見(jiàn)光區(qū)對(duì)每個(gè)濾光片進(jìn)行掃描，其檢測(cè)值與標(biāo)定值之差為濾光片波長(zhǎng)精度。
◎通噵差與孔間差檢測(cè)：通道差檢測(cè)是取一只酶標(biāo)板小孔杯（杯底須光滑，透明，無(wú)污染以酶標(biāo)板架作載體， 將其（內(nèi)含200ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.500A左右）置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置，蒸溜水調(diào)零，1于490nm處連續(xù)測(cè)三次,觀察其不同通道的檢測(cè)器測(cè)量結(jié)果的一致性，可用極差值來(lái)表示。孔間差的測(cè)量是選擇同一廠家，同一批號(hào)酶標(biāo)2板條（8條共96孔）分別加入200ul甲基橙溶液（吸光度調(diào)至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸溜水調(diào)零,于490nm處檢測(cè)，其誤差大小用±1.96s衡量。
n 零點(diǎn)飄移（穩(wěn)定性觀察）：取8只小孔杯分別置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置，均加入200ul蒸溜水并調(diào)零，于490nm處每隔30分鐘測(cè)一次，觀察各個(gè)通道4小時(shí)內(nèi)吸光度的變化。
◎精密度評(píng)價(jià)：每個(gè)通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同．濃度的甲基橙溶解，蒸溜水調(diào)零，于490nm作雙份平行測(cè)定，每日測(cè)二次（上下午各一次），連續(xù)測(cè)定20天。分別計(jì)算其批內(nèi)精密度，日內(nèi)批精密度,日間精密度和總精密度及相應(yīng)的CV值。
◎線性測(cè)定：用電子天平稱取甲基橙配制5個(gè)系列的溶液，于490nm平行測(cè)8次，取其均值。計(jì)算其回歸方程，相關(guān)系數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)估計(jì)誤差s，并用±1.96s表示樣品測(cè)量的誤差范圍.ELISA試劑盒雙波長(zhǎng)測(cè)定評(píng)價(jià)：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測(cè)定波長(zhǎng)為490nm，校正波長(zhǎng)為585nm），先后于8個(gè)通道檢測(cè)，每個(gè)通道測(cè)3次，比較各組之間是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，以考察雙波長(zhǎng)消除干擾組分的效果。
◎一般酶標(biāo)儀無(wú)585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片。450nm 濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長(zhǎng)為630nm）。
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