在ELISA試劑盒實驗中，有很多新手在檢測時候遇到試驗的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測定的重復(fù)性差，這是什么原因造成的？上海通蔚生物就以上問題作出具體解答，歡迎參考學(xué)習(xí)。
在ELISA試劑盒實驗中常見原因如下：
a)可能原因：加樣本及試劑量不準(zhǔn)；孔間不一致；
解決方法：校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時要緊密。
重復(fù)某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近；
重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；樣品稀釋前應(yīng)充分混勻。
b)可能原因：加樣過快，孔間發(fā)生污染；
解決方法：重復(fù)測定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性；加樣不要過快。
c)可能原因：加錯樣本；
解決方法：檢查記錄和試劑，是否加錯樣本。
d)可能原因：加樣本及試劑時，加在孔壁上部非包被區(qū)；
解決方法：加樣槍頭不要貼壁。
e)可能原因：不同批號試劑盒中組分混用；
解決方法：不同批號試劑盒中組分不可混用。
f)可能原因：溫育時間、洗板、顯色時間不一致；
解決方法：檢查時間是否一致。
g)可能原因：孔內(nèi)污染雜物；
解決方法：離心樣品，排除雜物。
h)可能原因：試劑/樣品沒有混勻；
解決方法：充分混勻樣品和試劑。
i)可能原因：血清標(biāo)本未*凝固即加入，反應(yīng)孔內(nèi)出現(xiàn)纖維蛋白凝固或殘留血
細(xì)胞，易出現(xiàn)假陽性反應(yīng)等。
解決方法：待血清標(biāo)本*凝固后做試驗。
在ELISA試劑盒實驗室，對試劑準(zhǔn)備一般不太注意，通常的做法是，在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用，而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題，其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。上海通蔚生物代理的ELISA試劑盒預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測定血清、血漿、組織勻漿或其它相關(guān)生物液體中目標(biāo)蛋白含量。
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