因此可以說基因工程就是分子生物學(xué)的工程應(yīng)用。人ELISA試劑盒現(xiàn)在基因工程所展現(xiàn)出的強(qiáng)大生命力和巨大的經(jīng)濟(jì)發(fā)展?jié)摿?得益于分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展，而且有證據(jù)表明，基因工程的進(jìn)一步發(fā)展仍然要依賴于分子生物學(xué)研究的發(fā)展。
顧名思義，分子生物學(xué)就是研究生物大分子之間相互關(guān)系和作用的一門學(xué)科，而生物大分子主要是指基因和蛋白質(zhì)兩大類；分子生物學(xué)以遺傳學(xué)、生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等學(xué)科為基礎(chǔ)。從分子水平上對生物體的多種生命現(xiàn)象進(jìn)行研究；分子生物學(xué)在理論和實(shí)踐中的發(fā)展也為基因工程的出現(xiàn)和發(fā)展打下了良好的基礎(chǔ)，人ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。
在人ELISA試劑盒中zui常用的酶為HRP和ALP。
（1）HRP：是一種糖蛋白，含糖量約18％，分子量為44kD，在蔬菜作物辣根中含量很高。HRP是一種復(fù)合酶，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞鐵血紅素） 結(jié)合形成一種卟啉蛋白質(zhì)。主酶為五色糖蛋白，在275nm波長處有zui高吸收峰；輔基是深棕色的含鐵卟啉環(huán)，是酶的活性基團(tuán)，在403nm波長處有zui高吸收峰。HRP的純度用純度值（reinhartzahl，RZ）表示，RZ＝A403nm／A275nm，即403nm的吸光度與280nm的吸光度之比，高純度HRP的RZ值應(yīng)≥3．0。HRP質(zhì)量的另一重要指標(biāo)是酶活力，以單位（unit，U）表示。用于標(biāo)記的HRP比活性應(yīng)≥250U／mg。HRP的作用底物為H202，催化下列反應(yīng)；
在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入。
注意的關(guān)鍵點(diǎn)是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對鄰近孔產(chǎn)生污染。人ELISA試劑盒出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以，有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。
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